急性腎盂腎炎常有血白細胞總數和中性粒細胞比例明顯增高、血沉增快、C反應蛋白＞20mg/L。膀胱炎時上述實驗指標多正常。
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清潔中段尿離心鏡檢中白細胞≥5個/Hp提示尿路感染，若見白細胞管型，提示腎盂腎炎。腎乳頭或膀胱炎可有明顯血尿。尿路炎症嚴重者，可有短暫明顯的蛋白尿。部分病兒可有血尿或終末血尿。
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尿培養是確定診斷的重要證據，要求在抗生素應用前做，排尿前勿多飲水。留尿過程中要嚴格按常規操作以免尿液污染。尿培養因可受前尿道和尿道周圍雜菌的污染，故需在治療前做清潔中段尿培養及菌落計數，若菌落計數≥10萬個/ml有診斷意義，1萬～10萬個/ml爲可疑。但已有膀胱炎尿路刺激症狀的患者，尿白細胞明顯增多，尿培養菌落計數爲1000～1萬個/ml亦應考慮尿感的診斷，此外，某些革蘭陽性球菌如腸鏈球菌分裂慢，如爲1000個/ml亦可診斷尿感。對嬰幼兒和新生兒以及懷疑尿感而留尿困難的小兒，可做恥骨上膀胱穿刺培養，陽性培養即有診斷意義。留做細菌培養的尿若不能及時送驗時，應暫放4℃冰箱內，否則會影響結果。有發熱的尿感應同時做血培養。大量利尿或已應用抗菌治療，則影響尿培養的結果。送尿培養如培養陽性應做藥物敏感試驗，指導治療。
尿液亞硝酸鹽還原試驗，可作爲過篩檢查，陽性率可達80%。
尿直接塗片找細菌
用一滴均勻新鮮尿液置玻片上烘乾，用亞甲藍或革蘭染色，在高倍或油鏡下每視野若見到細菌≥1個，表示尿內菌落計數＞10萬個/ml。根據尿沉渣塗片革蘭染色及細菌形態可作爲選用藥物治療的參考。
腎小管損傷的其他實驗室指標，尿β2-mG，尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)增高，尿滲透壓降低提示腎盂腎炎。
1、B超檢查：
可探查泌尿系的結構和膀胱排泄功能有無異常，有無結石、梗阻、殘餘尿等引起感染的誘因。
2、X線檢查：
靜脈腎盂造影可顯示泌尿系統有無先天畸形(如重腎、多囊腎等)、腎盂積水及其程度。瞭解腎的大小，有無腎盂腎盞變形等慢性炎症和腎瘢痕證據。對＜5歲的第一次尿感應做排泄性膀胱造影，以發現膀胱輸尿管反流及後尿道瓣膜等尿感誘因。
3、核素檢查：
核素99m鍀二巰基丁二酸(99mTc-Dimercaptosuceine acid，DMSA)腎靜態顯像可作爲上尿路感染診斷的可靠指標，對發現腎盂腎炎的敏感性和特異性均在90%以上。當急性腎盂腎炎時腎的輪廓正常，由於腎實質的炎性細胞浸潤，腎間質水腫、腎小管細胞壞死致DMSA減少，造成病變部位同位素分佈的稀疏區，當炎症消散後此種稀疏區可消失。在慢性腎盂腎炎，腎瘢痕形成時，病變部位的DMSA攝入更少，且腎外形可因瘢痕收縮而縮小或見楔形缺損區。
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